LyraFect™ Cell Transfection Reagent 楚原.pdf

LyraFect™ Cell Transfection Reagent

产品详情  

目录号： CY-1-0006  

保存方法 ：4℃ 12 个月

运输：常温    

产品简介

楚原昇科的LyraFect™ Cell Transfection Reagent是一款高性能 、高品质的通用型基因转染试剂， 既可用于传送质粒DNA，又具有较强的RNA转染能力。与其它转染试剂相比，具有不受血清影响 、毒性低 、稳定性好 、转染简单易行、重复性好等优点。

应用范围

LyraFect™ Cell Transfection Reagent可适用于众多较难转染细胞株的质粒DNA/siRNA的转染 。适用于多种贴壁细胞 ，特别适用于各种较难转细胞如L929 、 NIH3T3 、MCF-7和A549等，均可得到较高的转染效率，且重复性好。

质粒DNA的转染:

以24孔板为例，请参考表1的转染规模调整，步骤如下:

1.       细胞接种 :每孔接种 0.5~1.0×10⁵ 个细胞 ， 细胞培养 12~24小时，使转染时细胞密度达到60~70%融合度；

2.       DNA/siRNA稀释: 将0.5µg质粒DNA（或15pmol siRNA） 加入Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL；

3.       转染试剂稀释 :  取1μL的LyraFect™ Cell Transfection Reagent加入到9μL的 Opti-MEM培养基中，稀释后的终体积为10µL；

4.       复合物制备：将上述质粒DNA（或siRNA）稀释液和转染 试剂稀释液混合 ，轻轻吹打均匀后， 室温静置10分钟；

5.       将上述20µL复合物加入到24孔板中， 轻轻吹打混匀， 继 续培养18~48小时后检测转染效率， 无需更换培养基。

siRNA的转染:

转染步骤与DNA相同， 请参考表1的转染规模进行调整，所有数量和体积均是按孔计算 。转染高密度细胞可获得高转染效率 、高表达 水平和低细胞毒性。

质粒DNA和siRNA的转染优化:

表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA/siRNA的用量